Indiana Jones, poznat pustolov i arheolog, dolazi u posjed dnevnika koji sadrži tragove i kartu bez naziva i vodi do zagonetnog Svetog grala. Poslao mu ga je njegov otac dr. Henry Jones iz Italije. Nakon što je od privatnog kolekcionara Waltera Donovana čuo da je potraga za Svetim gralom propala nestankom njegova oca, Indiana Jones i kustos muzeja Marcus Brody odlaze u Italiju kako bi pronašli Indyjeva oca. Nakon što pronađu dr. Henryja Jonesa na nacističkom teritoriju, misija spašavanja pretvara se u utrku kako bi pronašli Sveti gral prije nacista, koji ga kane upotrijebiti kako bi njihova nadmoćna rasa zavladala cijelim svijetom. S dnevnikom kao važnim ključem zagonetke i mapom bez naziva kao vodičem, Indiana Jones ponovno se upušta u pustolovinu punu napetih situacija i uzbuđenja.